Manuel de prélèvement Biologiste
IMMUNOFIXATION (SANG)
| Analyse | IMMUNOFIXATION (SANG) | ||||
| Synonymes | IMMUNOFIXATION (SANG), IF, IMMUNOTYPING | ||||
| Spécialité | biochimie | ||||
| Technique de dosage | Immunofixation | ||||
| Détail de la technique de dosage | Elle se définit comme une technique de séparation électrocinétique effectuée dans un tube de diamètre interne inférieur à 100 µm rempli d’un tampon composé d’électrolytes. Par de nombreux aspects, elle se présente comme un intermédiaire entre l’électrophorèse classique de zone sur support et la chromatographie liquide. Le système CAPILLARYS utilise le principe de l’électrophorèse capillaire en solution libre, qui représente la forme la plus courante de l’électrophorèse capillaire. Il permet la séparation de molécules chargées en fonction de leur mobilité électrophorétique propre dans un tampon de pH donné, et, selon le pH de l’électrolyte, d’un flux électro-osmotique plus ou moins important. Les immunoglobulines monoclonales, marqueurs des gammapathies, sont détectées lors de l’électrophorèse des protéines. En électrophorèse capillaire, elles se présentent sous forme de pics anormaux situés essentiellement dans les zones bêta ou gamma globulines du profil électrophorétique. Dans les techniques CAPILLARYS IMMUNOTYPING et CAPILLARYS IMMUNOTYPING URINE, l’immunotypage est effectué à l’aide d’antisérums monospécifiques et permet l’identification de ces pics monoclonaux dépistés par électrophorèse. Le système CAPILLARYS comprend 8 capillaires en parallèle. Sur ce système, l’échantillon à analyser est injecté, par aspiration à l'anode, simultanément dans six capillaires. Pour l’immunotypage, le profil protéique de référence (profil ELP) est obtenu par injection de l'échantillon en présence de la solution ELP dans le capillaire N° 1. Les profils antisérums sont obtenus par injection du même échantillon en présence des antisérums de différentes spécificités anti-Ig G, anti-Ig A, anti-Ig M, anti-Kappa et anti-Lambda, dans les cinq autres capillaires (N° 2 à 6). La séparation est ensuite réalisée en appliquant une différence de potentiel de plusieurs milliers de volts aux bornes de chaque capillaire et la détection directe des protéines est effectuée à 200 nm côté cathode. Les capillaires sont lavés entre chaque analyse par une solution de lavage, puis par le tampon d’analyse. La superposition d’un des profils antisérum avec le profil ELP permet de visualiser la disparition et / ou la diminution d’un pic monoclonal sur le profil antisérum et d’en déduire une gammapathie. REMARQUE : Avec le tampon utilisé à pH basique, l’ordre de migration des protéines est le suivant, de la cathode à l'anode : gamma globulines,bêta–2globulines,bêta-1globulines,alpha-2globulines,alpha1globulinesetalbumine. Chaquefractioncontientunouplusieursconstituants.Le complexe immunoglobulines de l’échantillon (urine ou sérum) - immunoglobulines de l'antisérum spécifique apparaît en position très anodique (zone inter alpha-1/albumine ou plus anodique que l’albumine).L’immunotypage se réalise en quatre étapes : 1. Dilution du sérum ou de l’urine dialysée dans un diluant spécifique contenu dans le double puits de la barrette antisérums. La dilution est adaptée à la concentration en immunoglobulines de l’échantillon. 2. Mélange de l’échantillon dilué avec les différents antisérums. Le complexe antigène - anticorps se forme rapidement en milieu liquide sans étape d'incubation, ni de sédimentation. 3. Injection des échantillons traités par aspiration dans 6 capillaires (côté anodique) puis séparation électrophorétique des protéines en milieu alcalin par application d'une différence de potentiel de plusieurs milliers de volts aux bornes des capillaires. La détection directe des protéines est effectuée à 200 nm (côté cathodique). 4. Superposition du profil ELP et des profils antisérums (Ig G, Ig A, Ig M, Kappa et Lambda) permettant la caractérisation de la protéine monoclonale. |
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| Nature de l'échantillon | Sérum | ||||
| Principales indications | L'immunofixation est une technique associant succesivement électrophorèse des protéines sériques et immunoprécipitation. Elle permet la détermination de la nature du (ou des) composant(s) monoclonal(aux) en cause : IgG, IgA, IgM et le type de la chaîne légère associée à l'immunoglobuline monoclonale mise en évidence. A l'aide d'antisérums spécifiques, des protéines monoclonales particulières peuvent être identifiées : chaînes légères libres monoclonales kappa et lambda, IgD et IgE. Un aspect oligoclonal des immunoglobulines ou une restriction d'hétérogénéité peuvent être également décrits. Cet examen qualitatif ne permet pas de quantifier les immunoglobulines analysées. |
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| Biologiste responsable | Muriel Hoarau | ||||
| Manuel de prélévement | Réunilab | ||||
| Analyse vétérinaire | Non | ||||
| Laboratoires exécutants |
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| Examen accrédité Cofrac | |||||
| Commentaires COFRAC | |||||
| Famille COFRAC | Biochimie – Biochimie générale et spécialisée (BIOCHBM) | ||||
| Référence dossier validation des méthodes | |||||
| Lien référence dossier validation des méthodes | |||||
| Renseignements secrétariat | |||||
| code BIOMNIS | IFS | ||||
| code SIL | IF |
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| commentaire SIL | IFA : Antériorité rappelée si typage connu. | ||||
| Code LOINC | 0 | ||||
| Délai de rendu (hors délai de la poste) |
Le lendemain à 17h (si prélèvement prélevé ou réceptionné le matin au laboratoire) | ||||
| Fréquence de réalisation | 5/s | ||||
| Code NABM | 1571 | ||||
| Exigences NABM | |||||
| Prix fixe | Oui | ||||
| Conditions tarifaires | B 160 - réf 1571 ; B 200 - réf 1572 (électrophorèse + immunofixarion) | ||||
| Paramètre potentiellement prescrit dans le cadre de l'urgence | Non | ||||
| Paramètre toujours urgent | Non | ||||
| Analyse apparaissant sur le compte rendu patient | Oui | ||||
| Entente préalable | Non | ||||
| Attestation de consultation - Consentement | Non | ||||
| Documents à compléter | |||||
| Cotation | |||||
| Examen non remboursé (HN) | Non | ||||
| Prix € | 0 | ||||
| Conditions HN | |||||
| Préconisations Pré-analytiques | |||||
| Examen complémentaire selon résultat | Non | ||||
| Détail de l'examen complémentaire | |||||
| Préparation du patient | |||||
| Jeun | Non | ||||
| Renseignements cliniques à fournir et instructions complémentaires | A proscrire : sérum très lactescent ou très hémolysé | ||||
| Type de prélévement | Sang | ||||
| Instructions de prélévement | |||||
| Rythme Circadien | Non | ||||
| Bon de demande | Non | ||||
| Notice d'envoi | Non | ||||
| Fiche à télécharger | Non | ||||
| Matériel de prelevement | Boite de prélèvement sanguin | ||||
| Contenant | Tube sec avec gel sép. (SST) jaune | ||||
| Contenant acceptable | Tube sec sans séparateur rouge | ||||
| Contenant acceptable autre | |||||
| Autres contenants | |||||
| Tube gel avec séparateur autorisé | Oui | ||||
| Quantité minimale | 2 mL | ||||
| Mettre à l'abri de la lumière | Non | ||||
| Critères d' acceptation préanalytique | |||||
| Liens critères d' acceptation préanalytique | |||||
| Prélèvement au laboratoire indispensable | Non | ||||
| Délai maximum entre prélèvement et arrivée au laboratoire | 8h | ||||
| Liens délai maximum entre prélèvement et arrivée au laboratoire | |||||
| Température de transport au laboratoire | Température ambiante | ||||
| Lien température de transport au laboratoire | |||||
| Température de transport site unité technique | Température ambiante | ||||
| Délai de conservation de l'analyte sur échantillon adéquat conservé au laboratoire | 48h entre 2 et 8°C | ||||
| Délai de stockage et conservation des échantillons après analyse (vérification ID) | 3 jours entre 2 et 8°C | ||||
| Jour de prélèvement souhaitable | pas d'impératif | ||||
| Préconisations analytiques | |||||
| Fréquence de réalisation | 5/s | ||||
| Délai technique | j1 | ||||
| Délai maximum | j3 | ||||
| interférences analytiques / hémolyse | Oui | ||||
| Détails interférences hemolyse | |||||
| interférences analytiques / bilirubine | Non | ||||
| Détails interférences bilirubine | |||||
| interférences analytiques / lipémie | Oui | ||||
| Détails interférences lipémie | |||||
| interférences autre | Non | ||||
| Détail interférences autre | |||||
| Interférences analytiques liens | |||||
| Fiche technique | |||||
| Fiche technique liens | |||||
| FDS réactif | |||||
| FDS réactif liens | |||||
| Unité technique | Analyses Spécialisées (PT Ste Clotilde) | ||||
| Référence document qualité | |||||
| Lien référence document qualité | |||||
| Préconisations post-analytiques | |||||
| Valeurs usuelles ou thérapeutiques | |||||
| Existence de valeurs critiques | Non | ||||
| Valeurs critiques | |||||
| Valeurs critiques liens | |||||
| Incertitude de mesure, spécificité-sensibilité | |||||
| Prestation de conseils | |||||
| Liens prestation de conseils | |||||
| Incidence grossesse sur interprétation | Non | ||||
| Documents BIOMMIS | |||||
| Documents CERBA | |||||
| Bibliographie RéuniLAB | |||||
| Biothèque 1 an -20°C | Non | ||||
| Maladie à déclaration obligatoire MDO | Non | ||||
| liens MDO | |||||
| Versions fiche IMMUNOFIXATION (SANG) | |||||
| Version | Date | Action | Reviseur | Commentaires |
|---|---|---|---|---|
| 7 | 23-01-2015 | update | biologiste | maj |
| Fiche mise à jour le 18/02/2020 |
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